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ExCell(MB) MB000-5341 PrimeMut XL 定点突变试剂盒10 rxn

  • 商品编号:01.EXCELL(MB).MB000-5341
  • 货号:01.EXCELL(MB).MB000-5341
  • 品  牌:ExCell(MB)
  • 所得积分:625
  • 市场价: ¥1250.00
  • 销售价: ¥1250.00
  • 广州仓库:无现货  上海仓库:无现货  北京仓库:无现货
    (库存情况仅供参考,请来电确认准确的现货情况)
  • 本商品仅供科研之用,不可用于临床

产品说明:

       定点突变是一种广泛应用的分析蛋白和DNA的非常有力的工具。普通的定点突变试剂盒通常是基于反向PCR技术,采用高保真耐热DNA聚合酶和互补的突变引物向目的基因引入单个碱基或多个邻近碱基的突变、缺失、或插入。本试剂盒不但具有普通定点突变试剂盒的功能,而且当遇到多个位点突变的需求时,也可以实现一步多点突变,解决了普通单点突变试剂盒只能对目标位点逐一引入突变,耗时费力的问题。

      PrimeMut XL Site−directed Mutagenesis (MSDM)Kit针对每一个目标突变只采用一条经5’−磷酸化修饰的突变引物,利用保真性能和扩增效率俱佳的PrimeMut XL MSDM Enzyme的耐热DNA聚合酶活性,快速合成与模板互补的带有引物突变的DNA链(15~30 sec/1 kb),最大限度地保持扩增质粒的保真性,大大缩短反应时间。经过多个PCR循环反应后,带有多个特定突变的DNA链成倍增长。PCR反应结束后,采用5分钟快速限制性内切酶DpnI消化含有甲基化的质粒模板,而带有突变的环形单链质粒则通过转化而在大肠杆菌体内复制,最终得到带有不同突变组合的质粒DNA。

      本试剂盒适用于≤15 kb质粒的单点突变或者多点突变,根据质粒性质不同,最多可引入5个位点的突变、插入或删除(通常以1~3个位点突变为主)。该方法操作简单快捷,单点突变阳性率95%以上,相距1kb以上两点、三点突变阳性率在60%以上。

      本试剂盒提供一个4.5 kb、含有突变的lacZ基因的对照质粒,该质粒转化大肠杆菌后在含Amp、IPTG和X−gal的琼脂平板上呈白色菌落;采用试剂盒提供的Control Primer成功进行突变反应后,菌落呈现蓝色,可据此检测突变效率。

      本试剂盒采用特制高效快速转化感受态细胞,使样本转化及涂版整个过程只需10分钟就可完成。

                                                                                   

产品组分:

              成分                                                        MB000−5341 

PrimeMut XL MSDM Enzyme                                        10 μl

5 x PrimeMut XL Reaction Buffer                                  100 μl

5 x PrimeMut XL GC Reaction Buffer                              20 μl

PrimeMut dNTPs                                                          15 μl

Dpn I                                                                           10 μl

Control Plasmid (50 ng/μl )                                             5 μl

Control Primer (10 μM,5’磷酸化)                                   5 μl

ddH2O                                                                         1 ml

XL10−Gold competent cell                                          10×100ul

pUC19 control plasmid                                                   5ul

保存条件:

      −20℃保存,有效期一年;感受态细胞−70℃保存,有效期6个月。

 

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